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SOC培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)原理和質(zhì)控方法

更新時間:2024-09-14   點(diǎn)擊次數(shù):568次

一、用途

  用于基因工程菌大腸桿菌培養(yǎng)。


二、培養(yǎng)基配方(g/L)

胰蛋白胨

20.0

酵母浸粉

5.0

氯化鈉

0.5

氯hua鉀

0.186

氯化鎂

0.95

硫酸鎂

1.2

葡萄糖

3.6

pH值7.0±0.2   25℃


三、原理

  胰蛋白胨和酵母浸粉提供基本營養(yǎng),氯hua鉀、氯化鈉和氯化鎂可維持滲透壓并提供細(xì)菌生長所需的基本元素,促進(jìn)有關(guān)酶的合成,葡萄糖提供碳源。


四、試驗(yàn)方法

  1、稱取本品31.4克,加熱溶解于1000ml蒸餾水,分裝于試管中,每管9ml,116℃高壓滅菌30分鐘,備用。

  2、將標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控菌株稀釋至合適梯度,制備成含菌量10-100CFU/mL的菌懸液。

  3、將稀釋至合適梯度的標(biāo)準(zhǔn)儲備菌株接種到試管中,同時接種兩個平行管,置于36±1℃培養(yǎng)18-24h。


五、結(jié)果觀察與解釋

  接種以下質(zhì)控菌株,在36±1℃培養(yǎng)18-24小時:

質(zhì)控菌株

菌株編號

接種量(CFU)

生長情況

其他特征

大腸埃希氏菌

ATCC25922

10-100

+++

渾濁

大腸埃希氏菌

ATCC11775

10-100

+++

渾濁

大腸埃希氏菌

CMCC44568

10-100

+++

渾濁


圖1-1 SOC培養(yǎng)基微生物質(zhì)控結(jié)果

備注:a:大腸埃希氏菌(ATCC11775),b:大腸埃希氏菌(ATCC25922),c:大腸埃希氏菌(CMCC44568),d:空白對照


六、注意事項(xiàng)

  本培養(yǎng)基僅為細(xì)菌鑒定的一部分,需做其他補(bǔ)充試驗(yàn)。



注:本文屬海博生物原創(chuàng),未經(jīng)允許不得轉(zhuǎn)載。


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